POLYSCIENCES上海鼎桑代理
更新時間：2024-08-14
POLYSCIENCES上海鼎桑代理 美國POLYSCIENCES公司成立于1961年，主要生產(chǎn)和經(jīng)營LIFE SCIENCES生命科學（膠體金,不含甲醛的甲醇等），病理學和顯鏡學 微球和粒子和磁珠各種單體和聚體等產(chǎn)品。polysciences公司是世界上zui大zui全的多聚化合物供應商,同時是世界*的免疫學,組織化學試劑耗材供應商.
| 產(chǎn)地 | 進口 | 加工定制 | 否 |
|---|
代理優(yōu)勢品牌：tedpella 、Transgenomics(IDT) 突變檢測試劑盒 、mattek 培養(yǎng)皿 、Megazyme 試劑盒、Avanti 標準品、Alzet 滲透壓泵、 DSHB抗體、moltox 菌株、Toxin Technology 毒素、Jena Bioscience、 Goldbio、teknova培養(yǎng)基、Altogen Biosystems 轉(zhuǎn)染試劑、Scientific Commodities PE管、Coriell Institute DNA和細胞 、List毒素、BrainBits 培養(yǎng)基、Spectrum 膜、Neuromab 抗體 、BBI solutions膠體金 、braintree scientific 耗材pe管、AK Scientific抑制劑等、sutter 玻璃電極管、Reaschdiets小鼠食料
我們公司zui大優(yōu)勢是強大的采購：
上海鼎桑生物科技有限公司一家專注于生命科學的科技企業(yè)，由在國內(nèi)科研試劑領(lǐng)域有著豐富從業(yè)經(jīng)驗的技術(shù)團隊和管理團隊組建而成，專營進口生物試劑，科學儀器，實驗消耗品等。
公司將不斷把上優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品引入國內(nèi)市場，滿足客戶的需求，公司也將緊跟生命科學的發(fā)展，為廣大科研工作者探索生命科學的奧秘奉獻綿薄之力.
POLYSCIENCES上海鼎桑代理
POLYSCIENCES上海鼎桑代理
美國POLYSCIENCES公司成立于1961年，主要生產(chǎn)和經(jīng)營LIFE SCIENCES生命科學（膠體金,不含甲醛的甲醇等），病理學和顯鏡學 微球和粒子和磁珠各種單體和聚體等產(chǎn)品。polysciences公司是世界上zui大zui全的23966上海鼎桑代理 多聚化合物供應商,同時是世界*的免疫學,組織化學試劑耗材供應商.
上海鼎桑polysciences 23966大量現(xiàn)貨供應
轉(zhuǎn)染試劑線性PEI溶液的配制（1mg/ml）
聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）是聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子，每相隔二個碳個原子，即每“第三個原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子，使得聚合物網(wǎng)絡在任何pH下都能充當有效的“質(zhì)子海綿”(proton sponge)體。PEI，可用作轉(zhuǎn)染試劑，它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細胞。有實驗證明，分子量為25000的線性PEI即Polysciences 23966轉(zhuǎn)染效率zui高。
下面將主要介紹polysciences 線性PEI(#23966)的產(chǎn)品特性及其溶液的配制過程。
1. 產(chǎn)品特性:
產(chǎn)品名稱：線性聚乙烯亞胺(PEI)
CAS號 | 9002-98-6，26913-06-4 | 分子式 | (CH2CH2NH)n | 分子量 | 25000 |
熔點 | 73-75°C | 外觀 | 白色或黃色固體 | 結(jié)構(gòu)式 |
|
溶解性 | 溶于熱水，低pH值的冷水，甲醇和乙醇；不溶于：苯，aether和丙酮 | 儲存 | 室溫 |
2. 溶液配制
此指導說明書是經(jīng)polysciences公司研究，測試及其客戶反饋的后編寫的。下面推薦一種簡單適用而的方法，講述如何配制濃度為1mg/mL的轉(zhuǎn)染試劑的配制。
材料：
1g #23966、1L 純水（Milli-Q®純水，注射用水（WFI），或類似的生物級水）、12 M鹽酸、10 M氫氧化鈉、一次性0.1-0.2µm PES真空無菌過濾器、無菌高聚乙烯或聚丙烯試劑瓶。
器材：
1 L 玻璃燒杯、1 L玻璃量筒、核準pH計、2支1 mL塑料移液管、托盤、聚四氟乙烯（PTFE）攪拌棒、真空泵
配制過程：
1g #23966——900mL水溶解——攪拌、加熱（60-80°C）——加HCl調(diào)pH到2.0左右——蓋上燒杯，攪拌3h（直至粉末*溶解）——冷卻至室溫——加NaOH調(diào)pH到6.9-7.1——移液到量筒，加水補足至1L——真空過濾消毒——分裝，-20°C保存。
備注：加熱或加酸都有助于PEI溶解。當然酸可能不用加那么多，詳細用量可試加一點攪拌看看，足夠溶解就行，不一定需要加到pH那么低。
試劑儲存：
冷凍部分溶液可在-20°C保存長達一年；部分解凍的溶液可在4°C保存2周，不可反復凍融。
粉末儲存：
未開封的粉末有效期兩年。可在室溫下保存直至使用。
轉(zhuǎn)染操作流程：(瞬時轉(zhuǎn)染方法) 轉(zhuǎn)染效率（部分數(shù)據(jù)參考，本數(shù)據(jù)來源于網(wǎng)絡，不作為售后投訴依據(jù)）
1. 接種細胞： 轉(zhuǎn)染前一天，用膠原酶（WORTHINGTONG 公司 LS004196)消化細
胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置
入的細胞量應能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到 70~80%。
2. 準備 DNA-PEI 復合物： DNA、PEI 試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其
升至室溫。，用 Opti-MEM ITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適
量 DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋 PEI 試劑。每 1 μg DNA 需用 1-5 μL 線性 PEI 轉(zhuǎn)
染試劑。一邊輕輕渦旋裝有 DNA 溶液 的試管，一邊將稀釋的線性 PEI 轉(zhuǎn)染試劑滴
加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置 10~25 min 以
形成 DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如 NEST 5 mL /14
mL 離心管。
3. 轉(zhuǎn)染細胞： 直接向每個孔中加入 DNA-PEI 復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在
無血清條件下轉(zhuǎn)染時，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴 DNA-PEI 復
合物。轉(zhuǎn)染 3 h 后，添加½體積的包含 30%血清的生長培養(yǎng)基。
4. 孵育細胞和分析結(jié)果： 在 CO2 培養(yǎng)箱中 37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉(zhuǎn)
染后快 的話7 h 即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達。 請自行確定適合檢測時間。
細胞種類 中文名稱 PEI 轉(zhuǎn)染效率
HEK293 人胚腎細胞 90%-95%
293-T 人胚腎細胞 90%-95%
CHO-K1 倉鼠卵巢細胞 80%-90%
U251 人源神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞 80%-90%
Hela 人源宮頸ai細胞 70%-80%
COS7 猴 SV40 轉(zhuǎn)化腎細胞 70%-80%
HepG2 人源肝癌細胞 70%-80%
NIH/3T3 小鼠胚胎成纖維細胞 60%-70%
膠質(zhì)瘤干細胞 人源膠質(zhì)瘤干細胞 60%-70%
Patu8988 人源胰腺癌細胞 60%-70%
U2OS 人源骨肉瘤細胞 60%-70%
轉(zhuǎn)染試劑和 DNA 配比數(shù)據(jù)
細胞型號 培養(yǎng)基 每孔細胞數(shù) DNA 的量 轉(zhuǎn)染試劑量 和培養(yǎng)基混合 4-6h
293H DMEM 3×10
4
0.2µg 0.5µL DMEM+10%FBS
293FT DMEM 3×10
4
0.2µg 0.5µL DMEM+10%FBS
293E DMEM 3×10
4
0.2µg 0.5µL DMEM+10%FBS
293F DMEM 3×10
4
0.2µg 0.5µL DMEM+10%FBS
COS7 DMEM 1.5×10
4
0.4µg 0.5µL DMEM+10%FBS
hela DMEM 2×10
4
0.3µg 0.5µL 1640+15%FBS
Caco2 MEM 3.5×10
4
0.3µg 0.75µL MEM+10%FBS
BHK21 MEM 2×10
4
0.2µg 0.5µL MEM+10%FBS
CHO-DG44 DMEM+HT+pro 2×10
4
0.5µg 0.5µL DMEM+HT+pro +10%FBS
RAW264.7 DMEM 3×10
4
0.2µg 0.5µL DMEM +10%FBS
MCF7
MEM/NEAA+0.01mg/mL insulin + sodium
pyruvat
2×10
4
0.1µg 0.25µL
MEM/NEAA+0.01mg/mL insulin + sodium
pyruvat+10%FBS
SW480 IMDM 3×10
4
0.4µg 0.5µL IMDM +10%FBS
MDCK DMEM 4×10
4
0.6µg 1µL DMEM+10%FBS
CHO-K1 IMDM+Pro 3×10
4
0.2µg 0.5µL IMDM+Pro +10%FBS
HepG2 DMEM 3×10
4
0.5µg 0.75µL DMEM+10%FBS
A549 DMEM 2×10
4
0.3µg 0.5µL DMEM+10%FBS
NIH/3T3 DMEM 1.5×10
4
0.1µg 0.75µL DMEM+10%FBS
vero DMEM 3×10
4
0.3µg 0.75µL DMEM+10%FBS
sf9 SIM SF 5×10
4
0.4µg 0.75µL SIM SF+10%FBS
